TAE缓冲液(tae缓冲液需要灭菌吗)

242g Tris碱57.1ml冰乙酸100ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）是配置1L 50x的缓冲液使用的时候取决于你的容器有多大，一般用一个2L的试剂瓶的话，就是40ml储存液+水补满到2L，然后拼命混匀就可以倒进电泳槽作电泳缓冲液或者配置agarose TAE胶了

TAE是由三羟甲基氨基甲烷(Trisbase)、乙酸(aceticacid)和乙二胺四乙酸(EDTA)组成的缓冲液，英文名为三种组成成分的首字母。在分子生物学实验中常被用作DNA或RNA进行凝胶电泳时的缓冲液。

缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应，正极发生的是氧化反应（4OH--4e->2H2O+O2)，负极发生的是还原反应（4H++4e->2H2)，长时间的电泳将使正极变酸，负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力，使溶液两极的pH保持基本不变。

电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性，以利于DNA分子的迁移，例如，一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L的Na+离子，Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢；太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化。

电泳缓冲液还有一个组分是EDTA，加入浓度为1-2mmol/L，目的是螯合Mg2+等离子，防止电泳时激活DNA酶，此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀。

TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量（TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量），且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%，电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果，此外，回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小，长时间电泳（如过夜）不可选用，除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。

TAE的配方：

50×TAEBuffer配制方法：

1。称量Tris242g，Na2EDTA.2H2O37.2g于1L烧杯中；

2。向烧杯中加入约800ml去离子水，充分搅拌均匀；

3。加入57.1ml的冰乙酸，充分溶解；

4。用NaOH调pH至8.3，加去离子水定容至1L后，室温保存。

使用时稀释50倍或100倍即1×TAEBuffer或0.5×TAE